1、(1)提取光合色素
(资料图片)
2、用天平称取5 g绿叶,切成片,放入研钵中。将少量二氧化硅和碳酸钙放入研钵中,加入10 mL无水乙醇(丙酮也可),快速充分研磨。将一块尼龙布放在玻璃漏斗的底部,并将漏斗插入试管。将研磨液倒入漏斗中,
3、及时用棉塞塞住装有滤液的试管。
4、切加二氧化硅的作用:有利于充分研磨。
5、添加碳酸钙的原因:防止色素损伤。研磨时溶酶体会被破坏,溶酶体中的有机酸会流出,色素中有Mg。碳酸钙能与酸反应,防止酸与镁反应破坏色素。
6、加入无水乙醇(丙酮)的原因:光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂,绿叶中的光合色素可用无水乙醇提取。
7、快速研磨:防止乙醇挥发和色素损伤。
8、单层尼龙布的作用是过滤去除杂质。
9、棉塞塞紧的原因是为了防止乙醇(丙酮)挥发,提取液变少变干。(2)制备过滤带
10、将干燥的定性滤纸剪成长宽比试管略小的滤纸条,在滤纸条的一端剪去两个角,在离顶端1 cm的一端用铅笔划一条细横线。
11、滤纸条的长度和宽度略小于试管的长度和宽度:既能使滤纸条容易放入试管,又能防止滤纸条过小在试管内弯曲塌陷。
12、切掉滤纸条两个角的作用是:1。确保滤纸能立在烧杯中;2.确保滤纸上的滤液线可以水平扩展。
13、1 cm:保证滤纸条有足够的长度浸泡在色谱溶液中,使色素条不浸泡在色谱溶液(分离液)中。
14、用铅笔,不要用签字笔、圆珠笔、毛笔:签字笔、圆珠笔、毛笔的笔液色素也能溶于乙醇和色谱溶液,污染绿叶提取的色素。(3)画出滤液的细线
15、用毛细吸管吸少量滤液,沿铅笔线均匀画出细线(也可以用载玻片较短一端的边缘蘸取滤液,打印在滤纸条上)。滤液管线干燥后,重复绘制管线一次或两次。
16、滤液线要细而均匀:保证滤液颜料在同一起点。
17、滤线干后反复画线的原因:既保证了滤线的色素含量,又防止滤线过宽。画的次数越多,颜料越多,越容易跑,颜料带越分离越清晰。(4)分离光合色素
18、将适量的层析液(分离液)倒入试管中,将滤纸条划线端朝下,轻轻插入层析液中,并迅速塞住试管口。
19、(1)色谱液适量:保证有足够的量用于色素分离,防止色谱液淹没滤液管线,防止空气污染(色谱液易挥发有毒),避免试剂浪费。
20、色谱液的作用:色素可以溶解在色谱液中,不同的色素在色谱液中的溶解度不同。溶解度高的色素随色谱液在滤纸上迅速扩散;溶解度低的颜料在滤纸上扩散慢。这样,不同的颜料最终会在扩散过程中分离。
21、注意不要让色谱液体接触到滤液管线。接触后,大量滤液会溶解在色谱溶液中,导致实验失败。
22、试管口堵塞原因:色谱溶液易挥发,有一定毒性。(5)观察并记录
23、待层析液上缘扩散至接近滤纸条顶端时,将滤纸条取出,风干。观察滤纸条上所出现的色素带及其颜色,并做好记录。
24、最后滤纸条上将分离出四条色素带,颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色,四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
以上就是绿叶中色素的提取和分离这篇文章的一些介绍,希望对大家有所帮助。